Влияние бактериальной контаминации на качество семени хряка

Семя хряка очень чувствительно к росту бактерий и не защищено от бактериальной контаминации на всех этапах производства – от сбора до фасовки. В этой статье мы рассмотрим основные причины возникновения и последствия бактериальной обсемененности, а также поговорим о возможных способах решения проблемы.

За последние десятилетия наблюдается рост производства семени на станциях искусственного осеменения (далее – СИО). Некоторые станции достигают  результата 3000 доз в день. В то же время наблюдается ужесточение требований, предъявляемых к качеству семени. Основная причина такой тенденции – обеспечение высокой биобезопасности, генетической ценности и фертильной способности спермодоз. Кроме того, спермодозы должны сохранять высокие показатели в течение нескольких дней в процессе транспортировки на дальние расстояния или в период хранения. 

Источники бактериальной контаминации

Как уже отмечалось, бактериальное загрязнение может произойти на любом из этапов производства семени. Источники бактериального загрязнения во время сбора семени перечислены в Таблице 1.

Таблица 1: Источники бактериального загрязнения в процессе сбора семени

Хряк	Окружающая среда	Персонал
пенис	пол	одежда
препуций и препуциальная жидкость	воздух	обувь
фракция перед семенем	кружка для сбора семени	перчатки
волосяной покров и кожа	чучело	волосы и кожа
респираторные выделения	насекомые	респираторные выделения
кал

Следующим этапом, на котором семя подвергается опасности загрязнения, является процесс анализа семени, его разбавление и фасовка. Источники загрязнения представлены на данном этапе представлены в Таблице 2.

Таблица 2: Источники бактериального загрязнения в процессе анализа, разбавления и фасовки семени

Материал	Окружающая среда	Персонал
вода	воздух	одежда
разбавитель	насекомые	обувь
пипетки и наконечники	пол	волосы, кожа, ногти
шланги для розлива	стены	респираторные выделения
бак для среды или колбы	столы и стеллажи
краска для семени	раковины и водостоки
кружки и емкости для семени  оборудование

Последствия бактериального загрязнения

В результате исследований бактериальной контаминации нативного эякулята удалось выяснить, что большинство бактерий не являются первичными патогенами животных. Как правило, они не оказывают никакого влияния на клиническое состояния здоровья хряков и плодовитость свиноматок. 

Последствия бактериальной контаминации:

• Агглютинация семени
• Повреждение акросомы
• Потеря подвижности
• Снижение срока годности спермадоз

В большинстве случаев в эякулятах с низкой переживаемостью и высокой агглютинацией были обнаружены следующие бактерии: Alcaligenes xylosoxidans, Burkholderia cepaia, Enterobacter, E. Coli, Serratia, Stenotrophomonas. При этом степень микробиологического роста и последствия влияния бактерий на сперматозоиды могут быть непредсказуемы, так значение здесь имеет не только тип бактерии, но и восприимчивость к антибиотикам, длительность и температура хранения, рН, наличие другой микрофлоры. В данном случае разбавитель семени создает благоприятную среду для размножения бактерий, особенно при температуре выше 17°С. 

Как избежать бактериальной контаминации

Для того, чтобы избежать бактериального загрязнение, необходимо учитывать следующие моменты:

• Знать источники бактериальной контаминации
• Продумать дизайн зоны сбора и лаборатории
• Обучит персонал индивидуальной и общей гигиене
• Определить критические контрольные точки бактериального загрязнения и регулярно отслеживать ситуацию
• Использовать современные технологии для контроля бактериальной контаминации

Правила гигиены при сборе семени хряка

• В процессе взятия семени хряки должны быть чистыми и сухими, волосы в зоне препуция обстрижены.
• Во время сбора необходимо использовать одноразовый или простерилизованный сосуд, одноразовый пакет, перчатки и фильтры для семени.
• Место сбора должно быть чистым и сухим (особое внимание уделите внутренней поверхности чучела).
• Перед взятием очистите препуциальную зону сухим бумажным полотенцем. 
• После того, как хряк произвел садку, очистите препуциальный мешок от жидкости.
• Следуйте правилу двойной перчатки.
• После эрекции захватите пенис так, чтоб головка была свободной, во избежание контакта семени и перчатки оператора.
• Держите пенис под углом 45°С и отведите его в сторону от брюха хряка, чтоб предотвратить попадание грязи и жидкости с тела животного.
• Не собирайте первый секрет без сперматозоидов. Он содержит высокое количество бактерий.
• Осторожно удалите фильтр с гелевой фракцией, не отжимая его.
• Закройте пакет и максимально быстро передайте в лабораторию.

Преимущества системы автоматического сбора семени Collectis

После передачи эякулята в лабораторию, источниками загрязнения могут стать любые материалы, которые соприкасаются с семенем.

• Столы и полки должны быть максимально пустыми.
• Весь материал, соприкасающийся с эякулятом, по возможности, должен быть одноразовым.
• Не храните готовый разбавитель при комнатной температуре и выше более 6 часов, такая температура способствует размножению бактерий.
• Известны случаи, когда бактерии обнаруживались в красках для семени, особенно после их длительного хранения.
• Антибиотики в разбавителе контролируют рост бактерий, но они не могут полностью компенсировать гигиенические недостатки во время сбора или работы с семенем. 
• Не используйте раковины и сливы для утилизации отходов, эякулятов или старых доз. Контактируя с умывальниками ежедневно, персонал будет переносить бактерии по всей площади лабораторного помещения.

Современные фасовочные машины обеспечивают гигиену во время разлива спермадоз. Тем не менее, многократное использование шлангов и трубок, чистка, мойка, стерилизация влияют на свойства поверхности, которые могут привлекать бактерии, в итоге они эволюционируют в биопленку и становятся источником загрязнения.

Графики дезинфекции должны содержать четкие инструкции для персонала о том, что необходимо мыть и дезинфицировать, с какой кратностью и какими средствами.  Ежеквартально проводите мониторинг и определяйте контрольные критичные точки. 

Спермадозы хряка очень чувствительны к бактериальному росту, особенно когда дозы хранятся несколько дней. Основные принципы гигиенического производства семени: сбор семени с самым низким содержанием бактерий, минимальный контакт семени с персоналом, внешней средой и многоразовыми материалами, разработка эффективных санитарных стандартов и постоянный мониторинг критических точек на всех этапах производства доз – от сбора до хранения.

IMV Technologies